ELISA স্থিতিশীলতা ≤± 0.003Abs মাইকোটক্সিন পরীক্ষক ST-2000A তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিসীমা 400-900nm

ST-2000A মাইকোটক্সিন পরীক্ষক

ST-2000A মাইকোটক্সিন বিশ্লেষক আফলাটক্সিন এবং এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস এর জন্য একটি প্রয়োজনীয় বিশ্লেষণাত্মক যন্ত্র। সলিড-ফেজ এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (ELISA), যথা এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (ELISA), এই যন্ত্রটি এবং B1 কিট দ্বারা গঠিত, যা নমুনাগুলিতে অ্যাফ্লাটক্সিন B1 এবং অন্যান্য মাইকোটক্সিনের বিষয়বস্তু নির্ধারণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। একটি সীমিত এবং পরিমাণগত পদ্ধতিতে (যদি অন্যান্য কিট দিয়ে সজ্জিত করা হয়, তবে অন্যান্য টক্সিন হতে পারে সনাক্ত করা হবে)। এটি খাদ্য, ফিড, তেল, দুগ্ধজাত দ্রব্য, ওষুধ, পানীয়, ওয়াইন এবং অন্যান্য পণ্যগুলিতে আফলাটক্সিন বি 1 এবং অন্যান্য মাইকোটক্সিন সনাক্তকরণে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়।

কর্মক্ষমতা বৈশিষ্ট্য:

1. ডিসপ্লে অপারেশন: কালার এলসিডি স্ক্রিন, ভিডিওফোন ডিস্ট্রিবিউশন বোর্ড, পুরো বোর্ডের তথ্য প্রদর্শন, টাচ স্ক্রিন অপারেশন

2. ভাইব্রেটিং প্লেট ফাংশন: লেভেল 3 ভাইব্রেটিং প্লেটের গতি, সময় 0-255 সেকেন্ড সামঞ্জস্যযোগ্য

3. ওয়ার্কস্টেশন: পেশাদার এনজাইম মার্কার সফ্টওয়্যার, যা 500টি প্রোগ্রামের গ্রুপ, 100000টি নমুনা ফলাফল সংরক্ষণ করতে পারে এবং সমৃদ্ধ গণনা মোড প্রদান করে যেমন শোষণ, রৈখিক সমীকরণ, লগারিদমিক সমীকরণ, দ্বিঘাত সমীকরণ, ঘন সমীকরণ, শোষণ শতাংশ-মিক ঘনত্ব লোগার ফাংশন, বাধা হার, ইত্যাদি

প্রযুক্তিগত পরামিতি:

আলোর উত্স: DC12V 22W আমদানি করা হ্যালোজেন বাতি

তরঙ্গদৈর্ঘ্য পরিসীমা: 400-900nm

ফিল্টার: 405, 450, 492, 630nm স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে, অন্যান্য তরঙ্গদৈর্ঘ্য ঐচ্ছিক

পড়ার পরিসীমা: 0-4.000Abs

রেজোলিউশন: 0.001Abs

ইঙ্গিত ত্রুটি:≤±0.01Abs

স্থিতিশীলতা:≤±0.003Abs

পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা: ≤ 0.3%

আকার: 400 মিমি × 260 মিমি × 200 মিমি

1 নীতি এবং প্রয়োগ

এই কিট শস্য, ফিড এবং অন্যান্য নমুনায় আফলাটক্সিন বি১ (AFB1) সনাক্ত করতে পরোক্ষ প্রতিযোগিতামূলক ELISA পদ্ধতি ব্যবহার করে। কিটটি এনজাইম-লেবেলযুক্ত প্লেট দ্বারা গঠিত যা কাপলিং অ্যান্টিজেন, হর্সরাডিশ এনজাইম মার্কার, অ্যান্টিবডি, স্ট্যান্ডার্ড এবং অন্যান্য মিলে যাওয়া রিএজেন্টগুলির সাথে প্রি-কোটেড। পরীক্ষার সময়, স্ট্যান্ডার্ড বা নমুনা দ্রবণ যোগ করুন, নমুনায় আফলাটক্সিন বি১ এবং এনজাইম প্লেট অ্যান্টি-আফ্ল্যাটক্সিন বি১ অ্যান্টিবডির জন্য প্রতিদ্বন্দ্বিতা করার জন্য কনজুগেট অ্যান্টিজেনের সাথে প্রাক-প্রলিপ্ত থাকে। এনজাইম মার্কার যোগ করার পরে, রঙ বিকাশ করতে TMB সাবস্ট্রেট ব্যবহার করুন। নমুনা শোষণের মান নমুনায় থাকা আফলাটক্সিন বি 1 এর বিষয়বস্তুর সাথে নেতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত। নমুনায় আফলাটক্সিন বি 1 এর অবশিষ্ট পরিমাণ স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার সাথে তুলনা করে পাওয়া যেতে পারে।

2 প্রযুক্তিগত সূচক

2.1 কিট সংবেদনশীলতা: 0.03ppb (ng/ml)

2.2 প্রতিক্রিয়া মোড: 25 ℃, 30 মিনিট~15 মিনিট

2.3 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা:

সিরিয়াল................................................. ..... 0.15 পিপিবি

সূত্র ফিড.................................................. 0.3 পিপিবি

ভোজ্যতেল, চিনাবাদাম...................................... ০.৬ পিপিবি

সয়া সস, গম এবং অন্যান্য ফিড.................................. ০.৩ পিপিবি

বিয়ার.................................................. 0.3 পিপিবি

ওয়াইন, সয়া সস, ভিনেগার........................................ 0.15 পিপিবি

2.4 ক্রস প্রতিক্রিয়া হার:

Aflatoxin B1 100%

2.5 নমুনা পুনরুদ্ধারের হার:

সিরিয়াল এবং ফর্মুলা ফিড.................. 85% ± 15%

চিনাবাদাম.................................. ৮২ ± ১৫%

ভোজ্য তেল ................................. 85 ± 15%

সয়া সস, গম এবং অন্যান্য ফিড.................. 83 ± 15%

বিয়ার.................................. ৮৪ ± ১৫%

ওয়াইন, সয়া সস, ভিনেগার............ 87 ± 15%

3 কিট রচনা

এনজাইম মার্কার প্লেট........................................ 96 ছিদ্র

স্ট্যান্ডার্ড সমাধান (কালো কভার): 1 মিলি প্রতিটি

0ppb,0.03ppb,0.06ppb,0.12ppb,0.24ppb,0.48ppb

উচ্চ মান সমাধান: 100ppb................................. 1ml

এনজাইম মার্কার (লাল ক্যাপ) .................................. 5.5 মিলি

অ্যান্টিবডি কার্যকরী দ্রবণ (নীল ক্যাপ) .................................. 5.5 মিলি

সাবস্ট্রেট দ্রবণ A (সাদা ক্যাপ) .................................. 6 মিলি

সাবস্ট্রেট তরল বি (কালো আবরণ) .................................. 6 মিলি

পরিসমাপ্তি দ্রবণ (হলুদ টুপি)................................. 6 মিলি

20X ঘনীভূত ওয়াশিং সলিউশন (সাদা কভার)................................ 40 মিলি

নির্দেশিকা ম্যানুয়াল......................1 কপি

4 প্রয়োজনীয় সরঞ্জাম এবং বিকারক

4.1 যন্ত্রপাতি: আফলাটক্সিন টেস্টার, প্রিন্টার, হোমোজেনাইজার, নাইট্রোজেন ড্রাইং ডিভাইস, অসিলেটর, সেন্ট্রিফিউজ, গ্র্যাজুয়েটেড পাইপেট, ভারসাম্য (সংবেদনশীলতা 0.01 গ্রাম)

4.2 মাইক্রো-পিপেট: একক-চ্যানেল 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, মাল্টি-চ্যানেল 300 µ l

4.3 রিএজেন্ট: মিথানল, এন-হেক্সেন, ট্রাইক্লোরোমেথেন বা ডাইক্লোরোমেথেন

5 নমুনা প্রিট্রিটমেন্ট

5.1 নমুনা প্রক্রিয়াকরণের আগে নির্দেশাবলী:

পরীক্ষামূলক যন্ত্রপাতি অবশ্যই পরিষ্কার হতে হবে এবং পরীক্ষামূলক ফলাফলের সাথে দূষণ এবং হস্তক্ষেপ এড়াতে নিষ্পত্তিযোগ্য সাকশন হেড ব্যবহার করতে হবে।

5.2 সমাধান প্রস্তুতি:

সমাধান 1: নমুনা নির্যাস

70% মিথানল, অর্থাৎ ভি মিথানল: ভি ডিওনাইজড ওয়াটার＝7:3।

5.3 নমুনা প্রিট্রিটমেন্ট পদক্ষেপ:

5.3.1 শস্য প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি

1) একটি 50ml সেন্ট্রিফিউজ টিউবে চূর্ণ করা নমুনার 2g ওজন করুন, 5ml নমুনা নিষ্কাশন দ্রবণ যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 rpm/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

2) 0.5 মিলি সুপারনাট্যান্ট নিন, 0.5 মিলি ডিওনাইজড জল যোগ করুন এবং ভালভাবে মেশান;

3) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত: 5 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা: 0.15ppb

5.3.2 ভুট্টার ভুসি এবং গমের তুষের মতো শক্তিশালী জল শোষণ সহ নমুনার প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি

1) একটি 50 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে চূর্ণ করা নমুনার 2 গ্রাম ওজন করুন, 20 মিলি নমুনা নিষ্কাশন দ্রবণ যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 আরপিএম/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

2) 0.5 মিলি সুপারনাট্যান্ট নিন, 0.5 মিলি ডিওনাইজড জল যোগ করুন এবং ভালভাবে মেশান; (অত্যন্ত উচ্চ টক্সিন কন্টেন্ট সহ নমুনার জন্য, এটি 35% মিথানল দিয়ে পাতলা করা যেতে পারে এবং তারপর পরীক্ষা করা যেতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, 0.1 মিলি মিশ্র দ্রবণ 2-এ নিন) এবং 35% মিথানল মেশানোর জন্য 0.9 মিলি। চূড়ান্ত নমুনা পাতলা অনুপাত হল 200, এবং সনাক্তকরণ সীমা হল 6ppb।)

3) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত:20 নিম্ন সনাক্তকরণ লিমি: 0.6ppb

দ্রষ্টব্য: যেহেতু নমুনায় বিষের বন্টন অসম, তাই পরীক্ষার জন্য 2g নেওয়ার আগে একাধিক পয়েন্ট থেকে নমুনা নেওয়া এবং সম্পূর্ণরূপে মিশ্রিত করা প্রয়োজন।

5.3.3 ফর্মুলা ফিডের প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি

1) একটি 50 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে চূর্ণ করা নমুনার 2 গ্রাম ওজন করুন, 10 মিলি নমুনা নিষ্কাশন দ্রবণ যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 আরপিএম/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

2) 0.5 মিলি সুপারনাট্যান্ট নিন, 0.5 মিলি ডিওনাইজড জল যোগ করুন এবং ভালভাবে মেশান;

3) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত: 10 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা: 0.3ppb

5.3.4 ভোজ্য তেল, চিনাবাদাম এবং উচ্চ চর্বি খাওয়ানোর চিকিত্সা পদ্ধতি

1) একটি 50 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে চূর্ণ করা নমুনার 2 গ্রাম ওজন করুন, 8 মিলি এন-হেক্সেন এবং 10 মিলি নমুনা নিষ্কাশন দ্রবণ যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 আরপিএম/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

2) উপরের তরলটি সরান, নীচের তরলটির 0.5ml নিন এবং 0.5ml deionized জল যোগ করুন, ভালভাবে মেশান, তারপর মিশ্রিত তরলটির 0.5ml নিন এবং 0.5ml 35% মিথানল যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান;

3) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত: 20 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা: 0.6ppb

5.3.5 খাদ্য বা মশলা যেমন সস, গম, বিস্কুট, পেস্ট্রি এবং ফিড প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি যেমন ফিড ঘনীভূত

1) একটি 50 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে চূর্ণ করা নমুনার 2 গ্রাম ওজন করুন, 10 মিলি নমুনা নিষ্কাশন দ্রবণ যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 আরপিএম/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

2) 2 মিলি সুপারনাট্যান্ট নিন, 4 মিলি ট্রাইক্লোরোমেথেন (বা ডাইক্লোরোমেথেন) যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 আরপিএম/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

3) উপরের তরলটিকে অন্য পাত্রে স্থানান্তর করুন, নীচের তরলটি স্ট্যান্ডবাইয়ের জন্য ছেড়ে দিন, উপরের তরলে আরও 4 মিলি ক্লোরোফর্ম (বা ডাইক্লোরোমেথেন) যোগ করুন, সম্পূর্ণভাবে ঝাঁকান এবং 5 মিনিটের জন্য মিশ্রিত করুন এবং ঘরের তাপমাত্রা 4000 rpm/বিচ্ছেদ কেন্দ্র 10 মিনিট;

4) উপরের তরলটি সরান, নীচের তরলটি দুবার একত্রিত করুন এবং সম্পূর্ণভাবে মিশ্রিত করুন;

5) সম্মিলিত নিম্নতর তরলের 2ml নিন এবং এটি 50-60 ℃ নাইট্রোজেনের নিচে শুকিয়ে নিন;

6) শুকনো পদার্থকে সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করতে 0.5 মিলি নমুনার নির্যাস যোগ করুন এবং তারপরে মিশ্রিত করার জন্য 0.5 মিলি ডিওনাইজড জল যোগ করুন;

7) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত: 10 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা: 0.3ppb

5.3.6 বিয়ার প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি

1) বিয়ার পুরোপুরি নাড়ুন (CO2 সরান), বিয়ারের 2 মিলি নমুনা নিন, 1 মিলি পাতিত জল যোগ করুন, 7 মিলি মিথানল যোগ করুন এবং 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান;

2) 0.5 মিলি মিশ্র নমুনা দ্রবণ নিন এবং ভালভাবে মেশানোর জন্য 0.5 মিলি ডিওনাইজড জল যোগ করুন;

3) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত: 10 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা: 0.3ppb

5.3.7 ওয়াইন, সয়া সস এবং ভিনেগারের চিকিত্সা পদ্ধতি

1) 2 মিলি নমুনা নিন, 2 মিলি পাতিত জল যোগ করুন, 10 মিলি ট্রাইক্লোরোমেথেন (বা ডাইক্লোরোমেথেন) যোগ করুন, 5 মিনিটের জন্য ঝাঁকান, ঘরের তাপমাত্রায় 4000 আরপিএম/ বিচ্ছেদ কেন্দ্রের 10 মিনিট;

2) নিম্নতর তরল 1ml নিন এবং এটি 50-60 ℃ নাইট্রোজেনের অধীনে শুকিয়ে গাট্টা;

3) শুকনো পদার্থটি সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করতে 0.5 মিলি নমুনা নির্যাস যোগ করুন, তারপরে 0.5 মিলি ডিওনাইজড জল যোগ করুন এবং ভালভাবে মেশান;

5) 50 μL বিশ্লেষণ নিন।

নমুনা পাতলা অনুপাত: 5 নিম্ন সনাক্তকরণ সীমা: 0.15ppb

এলিসার 6টি ধাপ

4 ℃ কোল্ড স্টোরেজ পরিবেশ থেকে প্রয়োজনীয় রিএজেন্ট নিন এবং 30 মিনিটের বেশি ঘরের তাপমাত্রায় রাখুন। এমন স্ফটিক থাকতে পারে যেগুলি সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত করার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় পুনরুদ্ধার করতে হবে যখন ওয়াশিং সলিউশনটি কোল্ড স্টোরেজ হয়। প্রতিটি তরল বিকারক ব্যবহার করার আগে অবশ্যই ঝাঁকাতে হবে। প্রয়োজনীয় সংখ্যক মাইক্রোপোরাস প্লেট এবং ফ্রেমগুলি বের করুন, অব্যবহৃত মাইক্রোপোরাস প্লেটগুলিকে সেলফ-সিলিং ব্যাগে রাখুন এবং 2-8 ℃ তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন।

পরীক্ষার আগে, 20 × ঘনীভূত ওয়াশিং দ্রবণটি 20 বার ওয়ার্কিং ওয়াশিং দ্রবণে মিশ্রিত হয়।

6.1 সংখ্যায়ন: নমুনা এবং স্ট্যান্ডার্ডের অনুরূপ কূপগুলিকে ক্রমানুসারে সংখ্যা করুন, প্রতিটি নমুনা এবং স্ট্যান্ডার্ডের জন্য দুটি সমান্তরাল গর্ত করুন এবং স্ট্যান্ডার্ড হোল এবং নমুনা গর্তের অবস্থান রেকর্ড করুন।

6.2 নমুনা যোগ করার প্রতিক্রিয়া: তাদের নিজ নিজ কূপে 50 µ l/কূপ মান বা নমুনা যোগ করুন, তারপর এনজাইম মার্কার 50 µ l/ওয়েল যোগ করুন, তারপর 50 µ l/ওয়েল অ্যান্টিবডি কার্যকরী দ্রবণ যোগ করুন, একটি কভার প্লেট দিয়ে প্লেটটি সিল করুন ঝিল্লি, আলতো করে 5 সেকেন্ডের জন্য ঝাঁকান, মিশ্রিত করুন এবং 30 মিনিটের জন্য 25 ℃ এ প্রতিক্রিয়া করুন।

6.3 ওয়াশিং: কভার প্লেট মেমব্রেনটি সাবধানে সরিয়ে ফেলুন, গর্তে থাকা তরলটি শুকিয়ে নিন, 30 সেকেন্ডের ব্যবধানে 5 বার ওয়ার্কিং ওয়াশিং সলিউশন 250 µ l/হোল দিয়ে গর্তটি পুরোপুরি ধুয়ে ফেলুন এবং শোষক কাগজ দিয়ে শুকিয়ে নিন ( বুদবুদ যা প্যাট করার পরে সরানো হয় না একটি পরিষ্কার বন্দুকের মাথা দিয়ে পাংচার করা যেতে পারে)।

6.4 রঙের বিকাশ: প্রতিটি গর্তে 50 µ l সাবস্ট্রেট দ্রবণ A এবং 50 µ l সাবস্ট্রেট দ্রবণ B যোগ করুন, 5 সেকেন্ডের জন্য আলতোভাবে ঝাঁকান এবং ভালভাবে মিশ্রিত করুন এবং 15 মিনিটের জন্য 25 ℃ এ অন্ধকারে রঙ বিকাশ করুন।

6.5 সমাপ্তি: প্রতিটি গর্তে 50 µl টার্মিনেশন দ্রবণ যোগ করুন, আলতো করে ঝাঁকান এবং প্রতিক্রিয়াটি শেষ করতে ভালভাবে মেশান।

6.6 শোষণের মান পরিমাপ: 450 এনএম (দ্বৈত তরঙ্গদৈর্ঘ্য 450/630 এনএম সুপারিশ করা হয়) প্রতিটি গর্তের শোষণের মান পরিমাপ করতে আফলাটক্সিন পরীক্ষক ব্যবহার করুন। প্রতিক্রিয়া শেষ হওয়ার 10 মিনিটের মধ্যে সংকল্পটি সম্পন্ন করা হবে

6.7 ST-2000A স্বয়ংক্রিয় আফলাটক্সিন পরীক্ষক স্বয়ংক্রিয়ভাবে সংকল্প সম্পূর্ণ করে এবং স্বয়ংক্রিয়ভাবে ফলাফল তৈরি করে।